李   志 ^1,2   张馨允 ^1,2   蒋洪亮 ^1,2   冉茂乾 ^1,2   陈   露 ^1,2   焦彦朝 ³

摘 要 建立茶叶中18种农药残留的气相色谱-三重四级杆串联质谱（GC-MS/MS）检测方法。茶叶经过QuEChERS前处理，定容至1mL后，采用GC-MS/MS进行定性、定量检测分析。结果表明，18种农药在0.05~1.00 mg/kg质量浓度范围内线性关系良好，相关系数R2≥0.995；在空白茶叶基质中分别添加加标浓度为0.10 mg/kg、0.50 mg/kg、1.00 mg/kg；其加标平均回收率为89.34%~92.87%、精密度为5.015%~9.021%、检出限为0.0103~0.0254 mg/kg；各参数均符合GB/T 27404-2008《实验室质量控制范围  食品理化检测》相应参数要求，表明该方法科学可靠；同时，该方法具有高效、灵敏、快速等特点。

关键词 茶叶；气相色谱-三重四级杆串联质谱法；QuEChERS；农药残留

 Simultaneous Determination of 18 Pesticide Residues in Tea by QuEChERS-GC-MS / MS

 LI ZHI ^1,2   ZHANG Xin-Yun ^1,2   JIANG Hong-Liang ^1,2   RAN Mao-Qian ^1,2   CHEN Lu ^1,2   JIAO Yan-Chao ³

Abstract To establish a gas chromatography-triple quadrupole tandem mass spectrometry (GC-MS / MS) detection method for 18 pesticide residues in tea. The tea leaves were pre-treated by QuEChERS, and after the volume was adjusted to 1mL, GC-MS / MS was used for qualitative and quantitative detection analysis. The results show that the 18 pesticides have a good linear relationship within the mass concentration range of 0.05 ~ 1.00 mg / kg, and the correlation coefficient R2≥0.995; the spiked concentrations of 0.10 mg / kg, 0.50 mg / kg, and 1.00 mg were added to the blank tea matrix. / kg; the average recovery rate of the standard addition is 89.34% ~ 92.87%, the precision is 5.015% ~ 9.021%, and the detection limit is 0.0103 ~ 0.0254 mg / kg; Control range food physical and chemical testing "corresponding parameter requirements show that the method is scientific and reliable; at the same time, the method has the characteristics of high efficiency, sensitivity and speed.

Keywords tea; GC-MS / MS; QuEChERS; pesticide residue

茶作为一种天然的绿色保健饮料，居世界三大饮料（茶、咖啡、可可）之一深受人们喜爱^[1]。茶叶，由于具备抗氧化性、抗菌、抗癌和抗炎的特性而备受关注^[2-4]。我国是全球最大茶叶种植国、第二大茶叶生产国和第三大茶叶出口国^[5-6]，为提高茶叶产量，农药被广泛用于茶叶种植病虫防范，进而时常在茶叶中有农药残留检出或超标的情况出现。因此，茶叶质量安全引起国内外广泛学者的关注^[7-9]。卢森华^[10]等采用QuEChERS法与传统固相萃取法对比检测茶叶中25种农药残留；郭冬冬^[11]等采用气相色谱-四极杆/飞行时间质谱法快速筛查茶叶中350种农药残留；刘相真^[12]等采用GC-MS和LC-MSMS法快速测定茶叶中35种农药残留。目前，国内对茶叶农药残留检测的方法主要是GB/T 23204-2008《茶叶中519种农药及相关化学品残留量的测定 气相色谱-质谱法》^[13]。本文研究采用QuEChERS结合GC-MS/MS对茶叶中18种农药残留进行检测分析，该方法具有快速、准确、高效的特点，以期满足日常的茶叶农药残留检测。

1  材料与方法

1.1 材料与试剂

乙腈、正己烷、甲苯、丙酮（均为色谱纯）：国药集团化学试剂有限公司；无水硫酸钠、氯化钠（分析纯）：国药集团化学试剂有限公司；Cleanert TPT：上海楚定分析仪器有限公司；N -丙基乙二胺（N-propylethylenediamine， PSA）、MgSO₄、弗罗里硅土填料、C18填料、ECQUEU750CT-MP 萃取盐包（4 g MgSO₄，1 g NaCl，0.5 g柠檬酸二钠和1 g柠檬酸三钠）：美国Agilent公司。

16种农药标准物质（100 μg/mL,1.2 mL）：北京坛墨质检科技有限公司；茶叶：六盘水市售。

1.2 仪器与设备

GCMS/MS-TQ8050气相色谱-质谱联用仪（配有电子轰击源）：日本岛津公司；CPA225D赛多利斯天平：莱华尔科技（深圳）有限公司；DMT-2500多管旋涡混合仪：上海锦玟仪器设备有限公司；H1850R湘仪台式高速冷冻离心机：湖南湘仪实验室仪器开发有限公司；primix超高速乳化分散搅拌机：北京新月中科科技有限公司；R-1010中试旋转蒸发仪：西安禾普生物科技有限公司；SPE400全自动机械臂固相萃取仪：济南海能仪器股份有限公司；莱驰 GM300刀式混合研磨仪：广州艾威仪器科技有限公司。

1.3 方法

1.3.1 标准溶液的配制

将18种农药标准品配制成10μg/mL混合农药标准储备液，放于冰箱中冷藏，有效期为6个月。

精密移取标准储备液0.05 mL、0.1 mL、0.2 mL、0.5 mL、1.0 mL于10 mL容量瓶中，并用空白基质溶液定容至刻度，即得质量浓度为0.05μg/mL、0.10μg/mL、0.20μg/mL、0.50μg/mL、1.00μg/mL的标准工作液。以质量浓度（x）为横坐标，定量离子对的峰面积（y）为纵坐标进行标准曲线绘制。

1.3.2 样品的制备

将茶叶用研磨仪粉碎，过80目筛，放于冷藏箱中备用。

1.3.3 样品前处理

精密称取粉碎茶叶试样5.0 g（精确至0.001 g）于50 mL离心管中，加入8 mL纯水浸泡10 min后再加入10 mL乙腈，放于多管旋涡混合仪上旋涡振荡提取30 min，再将ECQUEU750CT-MP 萃取盐包加入离心管继续振荡提取10 min，移取1 mL茶叶提取液至2 mL微离心管中（装有150 mg无水硫酸镁、50 mg PSA 和50 mg石墨化碳黑），经旋涡振荡5 min，再放于冷冻离心机中以8000 r/min离心5 min，取上清液至自动进样瓶，供GC-MS/MS分析检测。

1.3.4 气相色谱-质谱条件

色谱条件：Rxi-5ms毛细管柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；进样口温度：270℃；柱温程序：初始温度80℃保持1 min，以25℃/min升温至200℃，再以15℃/min升温至300℃，保持7 min；载气：氦气，纯度≥99.999%；流速：1.35 mL/min；进样量1.0 μL；进样方式，不分流进样。电离方式为电子电离（EI）；电子能量70 eV；离子源温度230℃；驻留时间2.5 min；溶剂延迟时间3 min；采集参数：质谱多反应监测（Multiple reaction monitoring，MRM）（参数见表1）。

2  结果与分析

2.1 18种农药混标溶液总离子流色谱图

18种农药混标溶液总离子流色谱图（Total ions chromatogram，TIC）如图1所示。

2.2 18种农药线性回归方程

18中农药的保留时间和线性回归方程及相关系数R²见表2。

由表2可知，18种农药标准品在0.05~1.00 μg/mL质量浓度范围内线性关系良好，相关系数（R²）均≥0.995，符合GB/T 27404-2008《实验室质量控制范围  食品理化检测》相应参数要求，表明该方法科学可靠。

2.3 茶叶中18种农药检出限、精密度和回收率试验

以空白基质产生的3倍信噪比（S/N=3）计算检出限^[14-17]，向空白茶叶基质中添加18种农药标准储备液，添加量分别为0.10 mg/kg、0.50 mg/kg和1.00 mg/kg3个水平，按1.3.3步骤进行样品前处理，定容1 mL，上机分析检测。由表3可知，18种农药的方法检出限为0.0103~0.0254 mg/kg、平均回收率为89.34%~92.87%、精密度为5.015%~9.021%。各参数均符合GB/T 27404-2008《实验室质量控制范围  食品理化检测》相应参数要求，表明该方法科学可靠。

2.4 茶叶样品的实际检测试验

采用该方法对茶叶进行农药残留检测分析，由表4可知，对茶叶进行18种农药残留分析检测，其中毒死蜱、甲基对硫磷、p,p'-滴滴滴为阳性，其含量分别为0.0149 mg/kg、0.0168 mg/kg、0.0135 mg/kg，其余农药均为未检出。

3  结论

建立QuEChERS-GC-MS/MS法测定茶叶中18种农药残留的快速检测方法，该方法在0.05~1.00μg/mL质量浓度范围内线性良好，方法检出限为0.0103~0.0254 mg/kg、平均回收率为89.34%~92.87%、精密度为5.015%~9.021%。各参数均符合GB/T 27404-2008《实验室质量控制范围  食品理化检测》相应参数要求，表明该方法科学可靠。对茶叶进行18种农药残留检测分析，其结果有3种农药残留呈阳性，分别是毒死蜱（0.0149 mg/kg）、甲基对硫磷（0.0168 mg/kg）、p,p'-滴滴滴（0.0135 mg/kg）。

【该文经CNKI学术不端文献检测系统检测，总文字复制比为10.95 %。】

基金项目：海关总署科研计划项目（2018IK053）

第一作者：李 志（1989-），男，工程师，硕士，主要从事食品质量安全检测，E-mail:1611458766@qq.com

1.六盘水山地特色生态产品研究中心  六盘水  553000  2.国家果蔬检测重点实验室  六盘水  553000

3.贵阳海关综合技术中心  贵阳  550081

1. Liupanshui Mountain-featured Ecological Product Research Center, Liupanshui  553000  2. National Key Laboratory of Fruit and Vegetable Testing , Liupanshui  553000  3. Guiyang Customs Comprehensive Technology Center, Guiyang  550081

表1 18种农药组分CAS号、多反应监测参数

Table 1 CAS number and multiple reaction monitoring parameter of 18 pesticide components 

图1 18种农药标准品的总离子流色谱图

Fig.1 Total ions chromatogram of 18 kinds of pesticide standards

表2 18种农药标品的保留时间、线性回归方程及相关系数

Table 2 Retention time,linear regression equation and correlation coefficient of 18 kinds of pesticides standards

表3 茶叶中18种农药检出限、回收率和及精密度试验

Table 3 Detection limit, recovery rate and precision test of 18 pesticides in tea

表4 茶叶样品中18种农药残留检测试验结果

Table 4 Test results of 18 pesticide residues in tea samples

 注：“N.D”表示未检出

参考文献

[1]张艳,李慧冬,丁蕊艳,郭长英,毛江胜,陈子雷.QuEChERS-GC-MS同时测定梨中21种有机磷农药残留[J].食品工业, 2019, 40(11):323-327.

[2]孟洋,陈莉,卢红梅.茶叶副产物中的有效成分、功效及综合利用研究进展[J].食品研究与开发, 2020, 41(05):207-212.

[3]杨普香.茶叶有效成分的医疗保健功效[J].蚕桑茶叶通讯, 2016(03):39.

[4]章志强,掲国良.茶饮料中功效成分与茶叶选择及加工工艺的密切关系[J].安徽农学通报(上半月刊), 2012, 18(01):39-40+45.

[5]冷杨,尚怀国,李莉.2019年我国茶叶进出口贸易情况简析[J].中国茶叶, 2020, 42(03):28-30.

[6]丁亦男,童小麟,赖国银,徐敦明,林立毅,黄旖珏,张志刚.国内外茶叶农药残留限量标准与出口茶叶安全研究[J].食品安全质量检测学报, 2019, 10(23):8140-8145.

[7]吕冰,朱盼,李荷丽,杜晓林,赵云峰,苗虹.QuEChERS-气相色谱-质谱法测定土豆中109种农药残留[J].中国食品卫生杂志, 2014, 26(03):238-244.

[8]袁河,吴建霞,楼小华,王垄,龙薇运,李清亮,赵振宇.QuEChERS-GC-MS/MS法同时测定稻草中的106种农药残留[J].酿酒科技, 2017(06):108-115.

[9]冯伟,张代辉,张勋,杨璐,赵韫慧,滕国生.QuEChERS法提取-气相色谱-串联质谱法测定生态纺织品中31种农药残留[J].理化检验(化学分册), 2015, 51(10):1386-1392.

[10]卢森华,梁爽,黎强,陈宇,庞小莲,钟盈盈,唐明华.QuEChERS法与传统固相萃取法对比检测茶叶中25种农药残留[J].湖北农业科学, 2019, 58(23):176-181+188.

[11]郭冬冬,杨方,李捷,傅红.气相色谱-四极杆/飞行时间质谱法快速筛查茶叶中350种农药残留[J].分析试验室, 2019, 38(10):1177-1188.

[12]刘相真,叶美君,陆小磊.GC-MS和LC-MSMS法快速测定茶叶中35种农药残留[J].中国茶叶加工, 2019(03):48-58.

[13]中国国家标准管理委员会.茶叶中519种农药及相关化学品残留量的测定GB/T 23204-2008[S]. 北京：中国标准出版社, 2008.

[14]褚能明,杨俊英,柴勇,康月琼,张雪梅.QuEChERS-GC-MS/MS法同时测定竹笋中49种农药残留量[J].西南农业学报, 2015, 28(03):1288-1294.

[15]何健安,莫晓君,甘静妮.QuEChERS-GC-MS/MS测定茶叶中八氯二丙醚(S-421)残留量[J].热带农业工程, 2015, 39(Z1):7-9.

[16]陈红燕,王龙根,徐振球.QuEChERS-GC-MS/MS快速分析小麦中嘧霉胺的农药残留[J].吉林农业, 2015(24):59-60.

[17]田菲菲,张曦,马金凤,杨晓春,范军.气相色谱-串联质谱法同时分析葡萄基质中196种农药残留[J].食品安全质量检测学报, 2016, 7(03):1069-1081.

（文章类别：CPST-C）