谭 曜1 陈 平1 赵少浩1 钟莺莺1 应海松1 曹国洲1 黄元元1

摘 要 了解蜂胶及自制中药组合物对甲状腺囊肿的综合疗效。临床上已了解自制中药组合物具有较好的抗甲状腺囊肿作用。但目前蜂胶对甲状腺囊肿的疗效还了解甚少，为此，本文开展蜂胶及其中药组合物对实验鼠甲状腺囊肿模型影响的研究。研究表明，蜂胶和自制中药组合物对实验鼠甲状腺囊肿治疗有协同作用，蜂胶在不影响FT4合成的情况下，可促进FT3合成，蜂胶在达到一定浓度后，才促使TSH明显下降，减小甲状腺囊肿。蜂胶和自制中药组合物一起对甲状腺囊肿起到协同治疗作用。

关键词 蜂胶；中药组合物；实验鼠甲状腺囊肿模型

 Effect of Propolis and Its Traditional Chinese Medicine Compositions on Mice's Medicine-induced Goiter Model

TAN Yao1  CHEN Ping1  ZHAO Shao-Hao1  ZHONG Ying-Ying1  YING Hai-Song1  CAO Guo-Zhou1  HUANG Yuan-Yuan1

Abstract This study is intended to investigate the comprehensive anti-goiter effect of propolis and the self-made traditional Chinese medicine composition. It is known that the self-made traditional Chinese medicine composition has a great anti-goiter effect. At present, the curative effect of propolis on goiter is still poorly understood. Thus, this paper has conducted a study on the effects of propolis and its traditional Chinese medicine composition on experimental goiter of mice. The results showed that propolis and self-made traditional Chinese medicine had synergistic effect on the treatment of goiter of experimental mice. Propolis could promote the synthesis of FT3 without affecting the synthesis of FT4. When propolis reached a certain concentration, it could significantly reduce TSH and goiter. Therefore, propolis and the self-made traditional Chinese medicine could play a synergistic role in the treatment of goiter.

Keywords propolis; traditional Chinese medicine compositions; mice's medicine-induced goiter model

甲状腺囊肿又被称为结节性甲状腺肿，主要表现为甲状腺不同程度的肿大，可以触摸感觉到甚至肉眼看到许多大小不等的结节，是目前人类一种常见甲状腺疾病，大多数患者是由于其甲状腺上皮细胞良性增生太过而产生的^[1]。该病以女性和老年人群发病率高，约在7%以上，其中甲状腺癌约占5%～15%^[2]，其发病因素主要包括性别、年龄、遗传、放射线接触史及其他^[3]。对于甲状腺囊肿，目前西医采取的主要方法是手术和西药治疗。采用手术治疗，甲状腺囊肿复发率高达18%～30%^[4]左右；而采用传统西药治疗，其最常用的西药甲状腺激素如果长期服用有副作用，会较大影响甲状腺的正常生理功能^[5]。

中医病名中并没有结节性甲状腺肿一说，而是根据该病的主要临床表现，将该病归属于中医“瘿病”“瘿瘤”“瘿囊”“瘿气”的范畴^[6]。自制中药组合物是参照其他专家治疗甲状腺囊肿的经验处方，该处方以夏枯草、鹅肠菜等为主药，软坚散结，舒肝理气，行气散瘀效果显著，遵循中医古法合理配伍，无副作用，复发率低，在临床有较好的疗效。

蜂胶是蜜蜂从野外采集各种天然树脂，然后与蜂蜡、蜜蜂自身分泌物等混合而成，具有芳香味的1种黏性胶状物^[7]。通常一个5万～6万只的蜂群1年只能生产蜂胶100～150 g，因此被人们称为“紫色黄金”^[8]。如今已分离发现蜂胶中含有300多种化学物质^[9]，主要是黄酮类、氨基酸类、酚醇类、酸酯类、醛酮类、糖类、烃类物质、脂肪酸与脂肪酸酯、维生素和矿物质等^[10-11]。通过研究证明，蜂胶具有消炎抑菌、护肝、降血糖、抗肿瘤和抗病毒等功效 ^[12-16]。当今世界各国越来越青睐于绿色天然药物，也愈加重视包括中草药在内的天然药物的医用价值及发展潜力。我国是养蜂大国、蜂胶资源大国和蜂胶原料出口国，蜂胶作为天然药物，符合现代药物的发展方向和用药标准，但目前人们对蜂胶治疗甲状腺囊肿的效果还了解甚少。因此，深入开展蜂胶及其中药组合物对实验鼠甲状腺囊肿模型疗效的研究，对蜂胶资源的充分利用、研制安全和有效的临床用药意义重大。

1  实验材料、过程及方法

1.1 动物

SPF级健康新生实验鼠60只，体重约20 g左右，雌雄各半。

1.2 试剂

蜂胶（巴西蜂胶WAX GREEN公司）；

左甲状腺素钠片（德国默克雪兰诺有限公司）；

丙硫氧嘧啶片（上海朝晖药业有限公司）；

中药组合物（自制）：由夏枯草、鹅肠菜等中药组成，两次各250 mL 煎制，最后合并至500 mL；

鼠游离三碘甲状腺原氨酸（Free-T₃）ELISA试剂盒（上海恒远生物有限公司，产品编号： HB1344-Mu）；

鼠游离甲状腺素（FT₄）ELISA试剂盒（上海恒远生物有限公司，产品编号：HB1342-Mu）；

鼠促甲状腺激素（TSH）ELISA试剂盒（上海恒远生物有限公司，产品编号：HB969-Mu）。

1.3 仪器

电子天平（感量0.0001 g）；酶标仪。

1.4 过程

第一步，SPF级健康新生鼠60只适应性饲养1周后，按质量随机分为6组^[17]。

第二步，实验鼠建模^[18]：随机选取10只作为正常对照组（给予0.9%氯化钠水溶液1 mL/100 g）。将其余50只鼠按对照表随机分为5组，即模型对照组、中药汤剂组、蜂胶粉末（低剂量）+中药汤剂组、蜂胶粉末（高剂量）+中药汤剂组、左甲状腺素钠组。用0.9%氯化钠水溶液配制22 mg/mL丙硫氧嘧啶溶液，每天灌胃（灌胃剂量为1 mL/100 g），连续灌胃20天，建立实验鼠甲状腺肿模型。

第三步，根据《药理学实验方法学》附表中人体用药剂量和实验鼠用药剂量换算得到后续实验鼠用药剂量。随后10天，正常对照组继续给予0.9%氯化钠水溶液1 mL/100 g。模型对照组（0.9%氯化钠水溶液1 mL/100 g）；中药汤剂组（1 mL/100g）；蜂胶粉末（低剂量20 mg/100 g）+中药汤剂组（1 mL/100 g，蜂胶直接用中药汤剂溶解灌胃）；蜂胶粉末（高剂量50 mg/100 g）+中药汤剂组（1 mL/100 g）；左甲状腺素钠组[将左甲状腺素钠用0.9%氯化钠溶液分别配制成25 μg/mL（每个药片0.1 g，0.05 g药片重量/ mL）]溶液、50 μg/mL溶液（0.1 g药片重量/mL），每日灌胃剂量为 1 mL/100 g，前5天 25 μg ( 0.05 g药片重量) /100 g·d ，后5天50 μg（0.1 g药片重量）/100 g·d。

第四步，每组每天定时定量分别被灌入相对应的测试物，连续10天。末次给药前1天禁食不禁水。 末次给药后1 h称量体重，然后用水合氯醛腹腔注射麻醉小鼠，摘眼球取血，无菌干燥管收集标本，静置1 h，4℃ 2000 r/min 离心10 min分离血清，然后处死动物，留取血清等备检。

1.5 鼠血清FT₃、FT₄、TSH指标测定

应用双抗体夹心法，照试剂盒使用手册步骤分别进行鼠血清FT₃、FT₄、TSH的测定。

1.6 统计学方法

实验结果使用SPSS 18.0统计软件进行实验数据处理，分析实验各组间差异性（P＜0.05表示有显著性差异）。

2  实验结果

实验各组对实验鼠血清FT₄、FT₃、TSH的影响见表1。

2.1 模型对照组对实验鼠血清FT₄、FT₃、TSH的影响

模型对照组通过与正常对照组比较，模型对照组FT₄、FT₃结果显著降低，TSH结果显著升高，P<0.05为有显著性差异，表明模型成功。

2.2 左甲状腺素钠组对实验鼠血清FT₄、FT₃、TSH的影响

与模型对照组比较，左甲状腺素钠组FT₄、FT₃明显升高，TSH明显降低，且P＜0.05为有显著性差异。

2.3 中药汤剂组对实验鼠血清FT₄、FT₃、TSH的影响

与模型对照组相比，中药汤剂组FT₄、FT₃均有升高恢复趋势，TSH有下降恢复趋势，但差异都无统计学意义。

2.4 蜂胶粉末+中药汤剂组对实验鼠血清FT₄、FT₃、TSH的影响

与模型对照组相比，蜂胶粉末（低剂量）+中药汤剂组、蜂胶粉末（高剂量）+中药汤剂组FT₄均有升高恢复趋势，但差异无统计学意义。

与模型对照组相比，蜂胶粉末（低剂量）+中药汤剂组、蜂胶粉末（高剂量）+中药汤剂组FT₃明显升高，P＜0.05为有显著性差异。

与模型对照组相比，蜂胶粉末（低剂量）+中药汤剂组、蜂胶粉末（高剂量）+中药汤剂组TSH均有下降恢复趋势。其中蜂胶粉末（低剂量）+中药汤剂组TSH差异无统计学意义；蜂胶粉末（高剂量）+中药汤剂组TSH明显下降，P＜0.05为有显著性差异。

3  讨论

丙硫氧嘧啶是一种抗甲状腺西药，实验中利用丙硫氧嘧啶给实验鼠灌胃，可创建一种经典实验鼠甲状腺肿模型。丙硫氧嘧啶可抑制实验鼠过氧化物酶，阻止碘氧化、酪氨酸碘化及偶联，而抑制合成甲状腺激素。此外，丙硫氧嘧啶还抑制实验鼠血清中FT₄转变为FT₃，导致实验鼠血清FT₃含量明显减少。由于实验鼠血清中FT₃、FT₄水平减少，通过负反馈调节作用，促进实验鼠垂体大量分泌TSH，从而导致实验鼠甲状腺增生发生囊肿^[19]。

左甲状腺素钠片由人工合成，在体内各因素作用下可转变为三碘甲状腺原氨酸，是当前临床最常用的甲状腺激素，促使FT₄转变为FT₃，由于血清中FT₃、FT₄水平增加，可抑制分泌TSH，防止增大甲状腺，阻止形成结节，从而可防治甲状腺囊肿^[20] 。

与模型对照组相比，中药汤剂组FT₄、FT₃结果均有升高恢复趋势，TSH结果有下降恢复趋势，但差异都无统计学意义。说明中药汤剂并不太影响甲状腺激素的生成与降解，其可以减小甲状腺囊肿的治疗作用可能与促进合成FT₄、FT₃途径无关，因此中药汤剂的优点是在治疗甲状腺囊肿过程中并不影响甲状腺正常生理功能。

与模型对照组相比，蜂胶粉末（低剂量）+中药汤剂组、蜂胶粉末（高剂量）+中药汤剂组FT₄均有升高恢复趋势，但差异无统计学意义。说明蜂胶粉末可能与促进FT₄合成无关。

与模型对照组相比，蜂胶粉末（低剂量）+中药汤剂组、蜂胶粉末（高剂量）+中药汤剂组FT₃明显升高，P＜0.05为有显著性差异，说明蜂胶在不影响FT₄合成的情况下，有促进FT₃合成的作用。

与模型对照组相比，蜂胶粉末（低剂量）+中药汤剂组、蜂胶粉末（高剂量）+中药汤剂组TSH均有下降恢复趋势。其中，蜂胶粉末（低剂量）+中药汤剂组TSH差异无统计学意义；蜂胶粉末（高剂量）+中药汤剂组TSH明显下降，P＜0.05为有显著性差异。说明蜂胶在达到一定浓度后，才促使TSH明显下降，减小甲状腺囊肿。蜂胶的加入，对中药汤剂治疗甲状腺囊肿起到协同作用。其完整地作用机制有待进一步研究。

从表1中可知，实验鼠中FT₄:FT₃: TSH总是维持在一定的比例之中，变化比较小。

表1  实验各组实验鼠中血清FT₄、FT₃、TSH含量的测定结果

Table 1  Determination of FT₄，FT₃ and TSH in serum of mice in each group

4  结论

(1) 丙硫氧嘧啶在试验中通过给实验鼠灌胃，可成功创建一种经典实验鼠甲状腺肿模型。而由人工合成的左甲状腺素钠片，可促使体内FT₄转变为FT₃，使得血清中FT₃、FT₄水平都得以增加，抑制分泌TSH，防止增大甲状腺，从而达到预防和治疗甲状腺囊肿的效果。

(2) 中药汤剂不太影响甲状腺激素的生成与降解，其优点是在治疗甲状腺囊肿过程中并不影响甲状腺正常生理功能。

(3) 蜂胶不影响FT₄的合成，但有促进FT₃合成的作用。蜂胶对TSH的影响有浓度值要求，只有当蜂胶达到一定浓度值后，才能促使TSH明显下降，减小甲状腺囊肿。因此，总地来说蜂胶和中药汤剂配伍，对治疗甲状腺囊肿可起协同作用，但其完整地作用机制有待进一步研究。

【该文经CNKI学术不端文献检测系统检测，总文字复制比为9.6%。】

参考文献

[1]高天舒, 齐腾澈. 碘过量与富碘中药对碘缺乏大鼠甲状腺内氧化应激的比较研究[J].中华内分泌代谢杂志, 2012, 28(10): 855-858.

[2]刘卫国, 张文兵. 分析探讨甲状腺疾病的临床诊断与治疗[J].中国卫生产业, 2014, 49(29): 150-151.

[3]朱荣娟, 王季良. 王季良主任治疗甲状腺结节经验[J].云南中医中药杂志, 2015, 36(3): 7-8.

[4]朱精强, 苏安平. 甲状腺结节手术治疗的合理选择[J].中国实用外科杂志, 2015, 35(6): 635-639.

[5]周聪, 禇斌斌, 梁琳. 甲状腺激素治疗甲状腺结节的临床研究[J].重庆医学, 2016, 45(6): 724-726.

[6]李楠, 杜丽坤.中医药治疗结节性甲状腺肿的研究进展[J].吉林中医药, 2016, 36(8): 850-852.

[7]徐响, 张红城, 董捷. 蜂胶功效成分研究进展 [J].食品工业科技, 2008, 29(9): 286-288.

[8]曹炜, 尉亚辉. 蜂产品保健原理与加工技术[M].北京:化学工业出版社, 2002: 48-49.

[9]王凯, 张翠平, 胡福良. 2012年国内外蜂胶研究概况[J].蜜蜂杂志, 2013(5): 4-8.

[10] Bankova V,Recent trends and important developments in propolis research[J]. Ecam, 2005(1): 29-32.

[11]喻建辉, 余春涛, 江平屿. 蜂胶软胶囊辅助降血糖功能研究[J]. 农产品加工, 2018(23): 66-69.

[12] Chan G C,Cheung K W,Sze D M. The immunomodulatory and anticancer properties of propolis[J]．Clinical Review in Allergy＆Immunology, 2013, 44(3): 262-273.

[13] Valenzuela-Barra G,Castro C,Figueroa C,et a1.Antiinflammatory activity and phenolic profile of pmpolis from two locations in Region Metropolitana de Santiago,Chile [J]. Journal of Ethnopharmacology, 2015(3): 37-44．

[14]王凯, 张江临, 胡福良.蜂胶抗炎活性及其分子机制研究进展[J]. 中草药, 2013, 44(16): 2321-2329.

[15]杜夏, 孙丽萍, 徐响.蜂胶及活性成分保肝作用的研究进展[J]．食品科学, 2012, 33(5): 305-308．

[16]廖敏, 陈玉, 沈艺楠, 等. 基于电子鼻的蜂胶真伪鉴别研究[J].农产品加工, 2017(1): 77-80．

[17]徐叔云, 卞如濂, 陈修. 药理实验方法学[M].2版.北京:人民卫生出版社, 2001: 1265.

[18]霍光,刘岩.消瘿瘤合剂对实验性甲状腺肿小鼠FT3及TSH 值的影响[J].辽宁中医药大学学报, 2010, 7(12): 198-199.

[19]田先翔, 王瑞, 泮剑英, 等. 活血消瘿片对实验性大鼠甲状腺肿的影响[J].医药导报, 2014, 7(33): 853-857.

[20]蔡军波, 张强, 方芳, 等. 小剂量优甲乐联合小金胶囊治疗结节性甲状腺肿的临床疗效及对甲状腺功能的影响[J]. 实用药物与临床, 2014, 17(6): 711-714.

（文章类别：CPST-B）