CopyRight 2009-2020 © All Rights Reserved.版权所有： 中国海关未经授权禁止复制或建立镜像
双重荧光PCR方法快速鉴定斑鳖与幼发拉底斑鳖的研究
作者：尹 羿1 汪 琳1 高志强1 任 彤1 蒲 静1 赵相鹏1 张 伟1 白子龙1
尹 羿1 汪 琳1 高志强1 任 彤1 蒲 静1 赵相鹏1 张 伟1 白子龙1
摘 要 建立同时鉴别检测幼发拉底斑鳖和斑鳖的双重荧光PCR方法。通过对鳖科动物细胞色素ｂ基因序列比对，针对幼发拉底斑鳖和斑鳖，设计合成通用引物和特异性鉴别探针，经反应体系和反应参数优化，建立了快速检测鉴定幼发拉底斑鳖和斑鳖成分的 TaqMan双重荧光PCR方法。特异性试验结果显示，建立的方法可以快速、准确地鉴定幼发拉底斑鳖和斑鳖，与白唇泥龟、大麝香龟、巴西红耳龟、窄桥麝香龟、东北鳖以及豹纹陆龟等6种龟鳖目动物无交叉反应。分析灵敏度试验结果显示，对内含目的基因的重组质粒，检测下限均可达到10 copies/μL，能够满足龟鳖产品检测对灵敏度的需求。对58份口岸送检的龟鳖目动物样本进行检测，检出幼发拉底斑鳖样品1份，与普通PCR测序结果一致。本研究建立的双重荧光定量PCR方法灵敏、特异，重复性好，可快速准确鉴定斑鳖属动物及其制品，本方法为口岸濒危动物及其产品快速鉴定提供了新的可靠方法。
