苹果牛眼果腐病菌Neofabraea perennans活性检测方法
作者:李 娜 黄河清 章桂明
摘 要 本研究以苹果牛眼果腐病菌 Neofabraea perennans 的 3 个菌株为供试材料,通过对 10 种活性染料设置 5 种不同浓度和 5 种不同染色时间的实验条件,筛选到染料 PI 能够区别孢子死活,其最佳的染色条件为 0.05 mg/mL,室温避光染色 4 min。再通过设置 5 种不同水浴温度(范围)和 5 种不同水浴时间(范围)对孢子进行处理,获得孢子的最佳热处理条件为 55℃ 湿热处理 10 min,并以传统萌发实验作为对照,结果显示,不同条件处理后的孢子染色率不能与孢子萌发率完全相符,其孢子不萌发数高于被染色比例,极有可能是孢子在所试温度下被钝化而无法萌发。本研究初步建立了基于 PI 染色法和荧光显微镜的苹果牛眼果腐病菌 Neofabraea perennans 的活性检测方法,能够对其分生孢子进行活性检测,从制样到检测完成仅需约 30 min,可用于口岸对该病菌的活性检测。